一、產(chǎn)品介紹
農(nóng)藥殘留快速檢測試劑盒執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)為:GB/T5009.199-2003,檢測原理為:基于酶抑制(率)法,有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對動物性神經(jīng)介質(zhì)膽堿酯酶(ChE)正常功能有抑制作用,其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。膽堿酯酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物類似物(碘化硫代乙酰膽堿ATCI或碘化硫代丁酰膽堿BTCI)水解,其水解產(chǎn)物與顯色劑(二硫代二硝基苯甲酸DTNB)發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生黃色物質(zhì),在412nm處測定吸光度的變化值(△A),計算出抑制率可以判斷出樣品中有有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的存在量。
二、產(chǎn)品特點
農(nóng)藥殘留檢測方法:
農(nóng)藥殘留檢測方法分為快速檢測與定量分析,這兩種方法各有優(yōu)缺點,綜合對比快速檢測方法更加具有應(yīng)用前景。
蔬菜水果等生鮮樣品具有流通速度快、儲存時間非常短、數(shù)量大、來源廣等特點,檢測時效性就變得非常重要,農(nóng)藥殘留快速定性檢測具有檢測用時短,成本低,操作方便,實驗環(huán)境要求低,危險性低等非常多的優(yōu)勢,檢測結(jié)果以綜合毒性來表征殘留量,能很好的反映出檢測樣品的農(nóng)藥殘留量,是非常適合大范圍推廣使用的檢測方法。
檢測靈敏度
通過大量標(biāo)準(zhǔn)品對照實驗,確定試劑的低檢出限,農(nóng)藥殘留快速檢測試劑對幾種常見農(nóng)藥的低檢測限及國標(biāo)要求檢出限如下表: 單位(mg/kg)
注:產(chǎn)品批次、酶活性、操作方法的不同,檢出限有一定的偏差。
檢測樣本制備
1、取有代表性果蔬除去泥土,天平稱取2g,葉菜取葉片部分,瓜果取皮(越薄越好)4g
2、將樣品剪成1cm2大?。ㄎ鸺籼。┯谛瓋?nèi),加入10ML緩沖液,輕微震蕩1~2分鐘
3、使用濾紙過濾(或靜置3~5分鐘后取上清液),即為樣本待測液(無雜質(zhì)、澄清透明)。
4、蔥、姜、蒜、辣椒等含刺激物;番茄等含有色素不易取到澄清透明樣品液;對于這些樣品需使用整體浸提法,取樣品時樣品橫切面不易觸碰提取液,提取樣品量為:表面積為2g葉菜葉面表面積。
測試
空白測試:
1、取一支試管加入2.5ML緩沖液,做空白對照,依次加入酶100ul ,顯色劑100ul,搖勻
2、37℃恒溫培養(yǎng)10分鐘(室溫≥25℃可常溫放置10分鐘)
3、向試管內(nèi)加入底物100ul
4、搖勻后立即倒入比色皿中,然后放入儀器指定通道內(nèi),按“對照測試”鍵,等待檢測結(jié)果,空白吸光度差值為△AO,△AO應(yīng)≥0.3
(注:試劑通用性強,基本適用于所有檢測儀器,不同儀器操作有所區(qū)別,請根據(jù)儀器選擇相應(yīng)按鍵操作)
樣品測試:
1、取適量試管,依次加入2.5ML待測樣本液,依次加入酶100ul ,顯色劑100ul,搖勻
2、37℃恒溫培養(yǎng)10分鐘(室溫≥25℃可常溫放置10分鐘)
3、依次向各試管內(nèi)加入底物100ul
4、搖勻后立即倒入比色皿中,然后放入儀器指定通道內(nèi),按“檢測”鍵等待檢測結(jié)果,樣品吸光度差值為△At
結(jié)果判斷:
判斷結(jié)果以抑制率來表征,結(jié)果計算方式為:
抑制率(%)=[(△AO-△At)/ △AO]*100
抑制率<50%時農(nóng)藥殘毒為陰性,判定為合格;抑制率≥50%時農(nóng)藥殘毒為陽性,抑制率>40%需復(fù)檢確認(rèn)
檢測結(jié)果抑制率表征了樣品的綜合毒性,不明代表單一某個農(nóng)藥品種超標(biāo)。
操作時注意事項:
快速檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性是和操作人員的操作密不可分的,在操作過程中應(yīng)該注意一下幾點,以提高檢測的準(zhǔn)確度:
1、熟練使用移液設(shè)備,確保每一次的取液量都無偏差
2、樣品測試時,一次檢測樣品不宜過多,加入底物后應(yīng)盡快開始樣品分析測試,隨著熟練程度加深可適當(dāng)加大單次檢測樣品數(shù)量。
3、操作時應(yīng)嚴(yán)格按照說明書步驟進行,不要遺漏或者顛倒操作順序
4、測試完成后清洗所有設(shè)備,避免殘留物影響檢測結(jié)果
三、拓展資料
農(nóng)藥殘留現(xiàn)狀與定義
農(nóng)藥殘留在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中施用農(nóng)藥后一部分農(nóng)藥直接或間接殘存于谷物、蔬菜、果品、畜產(chǎn)品、 水產(chǎn)品中以及土壤和水體中的現(xiàn)象。到目前為止,世 界上化學(xué)農(nóng)藥年產(chǎn)量近200萬噸,約有1000多種人工合成化合物被用作殺蟲劑、殺菌劑、殺藻劑、除蟲劑、落葉劑等類農(nóng)藥。農(nóng)藥尤其是有機農(nóng)藥大量施用,造成嚴(yán)重的農(nóng)藥污染問題,成為對人體健康的 嚴(yán)重威脅。
農(nóng)藥殘留產(chǎn)生原因
1、方法單一:缺乏正確使用農(nóng)藥的基本知識絕大多數(shù)農(nóng)戶僅用農(nóng)藥進行防治,原因很簡單: 殺蟲效果好,見效快。還有部分農(nóng)戶不講究用藥技術(shù)(如白粉病打葉的正面,霜霉病 打葉的背面,不能在晴天正午打藥),一旦認(rèn)為防治效果不佳,就加大用藥量,結(jié)果 使病蟲害產(chǎn)生了抗藥性。當(dāng)有了抗藥性的病蟲害又在危害田間的蔬菜時,就施用更大的藥量來防治。如此惡性循環(huán),蔬菜的農(nóng)藥殘留就會大大增加。更嚴(yán)重的是有的農(nóng)戶還違章在蔬菜上使用禁、限農(nóng)藥,用藥后,農(nóng)藥使用的安全間隔期還未到就忙于上市,這樣對人體產(chǎn)生的危害就更大了。
2、結(jié)構(gòu)錯誤:對使用無公害農(nóng)藥的認(rèn)識還不夠影響蔬菜質(zhì)量的農(nóng)藥主要為殺蟲劑類農(nóng)藥,在此類農(nóng)藥中又以有機磷類殺蟲劑為主,即三個70%:使用 農(nóng)藥中70%的為殺蟲劑;殺蟲劑中70%的為有機磷類殺蟲劑;有機磷類殺蟲劑中70%的為髙毒、劇毒、高殘留農(nóng)藥。部分農(nóng)戶認(rèn)為使藥后馬上見效的農(nóng)藥就是好農(nóng)藥,而低度的、無公害的生物農(nóng)藥價格高、效果慢,是浪費了人力和物力,這樣對蔬菜的質(zhì)量也產(chǎn)生 了一定的影響。
有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥
有機磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定,在施用后,農(nóng)藥的內(nèi)吸性、揮發(fā)性 、水溶性、 吸附性直接影響其在植物、 大氣、水、土壤等周圍環(huán)境中的殘留。溫度、光照、降雨量、土壤酸堿度及 有機質(zhì)含量、植被情況、微生物等;環(huán)境因素也在不同程度上影響著農(nóng)藥的降解速度,影響農(nóng)藥殘留。有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥中存在著部分高毒和劇毒品種,如甲胺磷、對硫磷 涕滅威、克百威、水胺硫磷等,如果被施用于生長期較短、連續(xù)采收的蔬菜,則很難避免因殘留量超標(biāo)而導(dǎo)致人畜中毒,監(jiān)測有機磷農(nóng)藥殘留量成為重點。
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